蜂王人工授精技术是一种借助设备对蜂王进行人工配种的技术。该技术不仅可以准确地将处女王与选定的雄蜂交配,还可以在自然状态下进行母子、父女、单雄授精等不可能的交配行为。蜜蜂人工授精技术广泛应用于原始纯化繁殖、培育近交系统、杂交品种和品种纯化。
一、选择雄蜂和处女王
雄蜂的质量与授精后蜂王的质量有关。受精后,蜂王不仅开产早,而且产卵旺盛,长期保持正常产卵。最好在中午12点到15点之前在蜂巢门口捕捉雄蜂。性成熟的雄蜂行动迅速,进入巢穴迅速。因此,必须在巢门口设置雄性格栅和其他障碍,以便于捕捉。大多数腹部坚固而小的雄蜂都是性成熟的雄蜂。腹部柔软,较大,更不成熟。从婚姻中飞回巢穴的雄蜂更兴奋。如果手指太大或被挤压,体内的阳茎会立即翻转并射精,所以我们应该注意小心。
授精前,我们应该选择处女王。一般来说,最好选择个体大、腹部长、行动稳定活泼的处女王。处女王授精的最佳时间为10~13天,即处女王出房后10~13天。如果授精过早,虽然处女王还没有达到性成熟期,但精子转移到蜂王储精囊的速度很慢。精液在蜂王输卵管中停留时间较长,授精蜂王无法产卵。一些精液在蜂王输卵管中恶化,导致蜂王死亡。如果授精过晚,处女王在核群和框架王笼中的时间过长,影响核群和框架王笼的使用效率。
二、仪器设备及消毒灭菌方法
主要仪器设备有实验台、药柜、蒸馏水器、体视显微镜(工作距离约100mm)(1600×)、蜂王人工授精仪、微量注射器、高压灭菌锅、雄蜂笼、酒精灯、电炉、二氧化碳瓶、软管、常用玻璃器皿、注射器及日用品。
实验室地面喷洒5%来苏消毒;实验室空间用紫外线灯灭菌15分钟。实验台用75% 酒精擦拭。耐高温授精器械及附件用高压灭菌锅灭菌15~20分钟,不耐高温器械用75%酒精擦拭或灌洗灭菌。用酒精消毒后,用无菌蒸馏水冲洗塑料注射针5~6次。
三、采集雄蜂精液及注意事项
在收集雄蜂精液之前,强迫精液排出。当所有准备工作准备就绪时,在飞行笼中捕捉飞行力强、腹部坚实的雄蜂,通过手向腹部末端施加压力,使腹腔血淋巴挤压内阳茎,迫使阳茎逐渐外翻。当阳茎球末端出现淡黄褐色精液时,停止挤压。加压时,用力应安全。不要操之过急。如果用力过大,很容易导致精液飞溅或阳茎球破裂。同时,注意不要让外翻的阳茎球和精液接触雄蜂体表面和操作人员的手指,造成污染。然后用微量采精器收集球面上的精液。首先,将采精器吸入一小部分空气,使稀释液与精液分离,以免将精液与大量稀释液混合。但是,吸入的气泡不能太大。如果吸入的空气很大,在采集精液或以后授精过程中会受到阻力;空气会膨胀和压缩变形,给采集精液或授精液带来不便。采集精液时,针尖应贴近精液表面,以免吸入下一只雄蜂精液下一只雄蜂精液,可以防止吸入粘液后尽快吸入粘液。即使是稀粘液也不能与精液混合,吸入针头。因为粘液不仅会堵塞针头,如注射到蜂王侧输卵管会凝固和堵塞输卵管,这不仅会影响精子进入储精囊,还会导致蜂王死亡。精液收集结束时,针头仍需吸入一段空气,然后用稀释剂密封,以避免针头因精液凝固而堵塞。
四、授精及操作要求
进针角度合适,部位准确。生殖道无损伤,操作过程无污染,授精量充足,操作速度快。
首先,将带有处女王的麻醉室固定在教授仪器的麻醉室上,并调整工作距离。同时,移动教授仪器(或显微镜),使处女王的腹部呈现在视野的中心,并调整到清晰。当处女王通过麻醉进入昏迷状态时,移动授精仪的背部和腹钩操纵杆,打开交配腔。此时,将背钩延伸到蜂王刺针鞘基部,并将其嵌入基部的三角形缝中。背钩嵌入后,再次调整背部和腹钩,拉开背部和腹板之间的距离。此时,您可以看到交配腔中心靠近刺针鞘基部的褶皱开口,即阴道开口,移动注射器,排出针前端的保护液和气泡,然后移动纵向导轨,使针尖靠近阴道开口,将阴道探针插入阴道,压住阴道瓣,使阴道开口扩张。然后调整纵向导轨,使针尖沿探针背部慢慢进入阴道,直到输卵管,取出探针。当针深度达到阴道开口时1.8毫米时,感觉有点阻力后停止注射,然后稍微退出针,开始注射精液。一次性授精通常注射8微升;每次注射4~5微升精液。第一次和第二次授精之间的间隔是24~48小时。注射后,10~15秒后退出针,卸下麻醉室,小心退出蜂王,标记蜂王,醒来后送回原核组。
五、授精蜂王的管理
授精蜂王的管理是指授精后至产卵期间的管理。蜂王的人工授精是由人工操作设备完成的。蜂王没有结婚。虽然已经授精,但人工授精后的蜂王仍然会飞出巢穴进行自然交配活动。因此,必须采取相应的管理措施,防止蜂王再次自然交配。目前,控制人工授精蜂王出巢后交配。大多数人在小核群的巢门口安装隔王山或脱粉,以控制蜂王飞出巢外。